|
Stocks |
|
5x Stock di Sali di Beijerinck: |
|
| NH4Cl |
40 g |
| CaCl2 (2H2O) |
5 g |
| MgSO4 (2H2O) |
10 g |
| Per 1 L H20 distillata |
|
|
Stock Fosfato: |
|
| K2HPO4 (anidro) |
14.34 g |
| KH2PO4 (anidro) |
7.26 g |
| Per 1 L di H20 distillata |
| Controllare il pH che deve essere circa 7.1, nel caso aggiustarlo con KOH. |
|
|
Stock di TRIS: |
|
| Tris base |
242 g |
| Per 1 L H20 distillata |
| Titolare il pH a 6.6 con HCl |
|
|
Soluzione di Microelementi (Hutner 1946, J. Bact. 52: 213): |
|
| Na2EDTA |
50.0 g |
| H3BO3 (Acido Borico) |
11.14 g |
| ZnSO4 - 7H2O |
22.0 g |
| MnCl2 - 4H2O |
5.1 g |
| FeSO4 - 7H2O |
5.0 g |
| CoCl2 - 6H2O |
1.6 g |
| CuSO4 - 5H2O |
1.6 g |
| (NH4)6Mo7O24 - 4H2O |
1.1 g |
| Per 1 L di H20 distillata |
Seguire le seguenti istruzioni:
- aggiungere tutti gli elementi, in sequenza, (eccetto l'EDTA) in un volume di 550 mL di H2O milliQ in una beuta da 1 L
- Scaldare la soluzione a circa 70 °C
- In un differente bicchiere, aggiungere l'EDTA in 250 mL di H2O milliQ e scaladare fino a completa dissoluzione
- Aggiungere la soluzione di EDTA alla soluzione di sali (non viceversa) e portare la soluzione combinata finale ad ebollizione
- Lasciare raffreddare la soluzione, mantenendola quindi a 70-75 °C
- Aggiustare il pH a 6.5-6.8 con 20% (w/v) KOH. Attenzione: non lasciare la temperatura scendere sotto a 70 °C o il pH scendere sotto a 6.8, altrimenti
occorre iniziare da capo
- Diluire fino a 1000 mL
- Utilizzare del cotone idrofilo (non il parafilm, o la pellicola) per coprire la solizione e lasciarla riposare per due settimane finche' il colore non cambia
da verde scuro a violetto.
Per accelerare il processo e renderlo omogeneo, agitare in continuo la soluzione
- Rimuovere la presenza di un eventiale precipitata rosso-marrone e mantenere la soluzione in frigo a 4 °C.
Notarsi che se il precipitato e' consistente,
la concentrazione dei vari microelementi non e' piu' accurata
|
|
Piaste di Agar: |
|
Aggiungere 1.5-2% w/v di Agar Nobile al mezzo (di solito 6-8 g in 400 mL di soluzione di TAP)
|
|
Ricetta TAP in formato PDF: Tap.pdf |
|
|
La ricerca è finanziata dalla Fondazione Cariplo nell'ambito del programma sulle
Biotecnologie e sulla Bioeconomia. |
 |
|
|
| CYAO-Web. V2.2 |
